核糖核酸酶(RNase)在生物體內(nèi)起著重要的作用，幾乎可以從任何一種原核生物與真核生物細胞中找到它的存在。它們具有降解和分解核糖核酸(RNA)分子的能力，參與調(diào)控細胞內(nèi)的RNA代謝和功能調(diào)節(jié)。根據(jù)其結構和功能特點，核糖核酸酶可以分為多個分類，如核糖核酸酶P(RNase P)、核糖核酸酶L(RNase L)等。

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核糖核酸酶A(RNase A)是核糖核酸酶家族中具代表性的成員之一。它早期從牛胰腺組織中分離得到，并被廣泛研究。RNase A具有高度特異性和高效性的RNA降解能力，通過切割RNA分子來調(diào)控細胞內(nèi)的RNA代謝功能。

Part.01?諾貝爾獎與核糖核酸酶A

對于生物化學專業(yè)的人來說Anfinsen經(jīng)典的核糖核酸酶變性和自復性實驗想必并不陌生。安芬森(Christian B. Anfinsen)，美國生物化學家，因對核糖核酸酶，特別是氨基酸序列與其生物活性構象之間關系的研究與摩爾(Stanford Moore)、施泰因(William H. Stein)共享1972年諾貝爾化學獎。

牛胰核糖核酸酶A能夠被高濃度尿素和還原劑（巰基乙醇）徹底地變性。還原劑打開了核糖核酸酶分子內(nèi)部4對二硫鍵的共價連接，尿素破壞了維系蛋白質結構的疏水相互作用，從而將酶從其穩(wěn)定結構變性為伸展的多肽鏈。蛋白質的結構是其活性和功能的前提，所以完全伸展的核糖核酸酶多肽鏈徹底喪失了催化活力。但是，當從反應體系中去除尿素和還原劑后，完全變性的多肽鏈會自發(fā)地重新折疊形成天然的構象，同時恢復其催化活力。在這個復性過程中，酶分子的8個半胱氨酸殘基必須形成其天然構象中原有的4對二硫鍵。從數(shù)學概率計算，8個半胱氨酸殘基隨機配對形成4對二硫鍵的組合共有105種，形成天然構象中的4對二硫鍵形式的概率是1/105。

在安芬森這一實驗中，多肽鏈沒有依靠任何其他輔助因素就找到了這1/105可能的天然構象，說明尿素破壞的蛋白質分子內(nèi)部的弱相互作用對二硫鍵的正確形成以及天然構象的實現(xiàn)至關重要。正是基于這一經(jīng)典實驗，安芬森提出多肽鏈氨基酸序列含有其三維結構的全部信息。安芬森的工作開創(chuàng)了近代蛋白質折疊研究的新時代，這個著名的實驗也被載入世界上多本經(jīng)典生物化學教科書。

Part.02 結構與功能

RNase A是一種核糖核酸內(nèi)切酶，可以特異地攻擊RNA上嘧啶殘基的3’端，切割與相鄰核苷酸形成的磷酸二酯鍵。反應終產(chǎn)物是嘧啶-3′-磷酸及末端帶嘧啶-3′-磷酸的寡核苷酸。

應用

· 去除DNA或蛋白質樣品的RNA污染

·?為DNA純化提供支持

·?RNA檢測- RNA酶保護分析法中應用

RNase A 適用于作用單鏈RNA。推薦工作濃度為10-20μg/mL，兼容于各種反應體系。

Part.03 金普諾安|核糖核酸酶A

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金普諾安自主研發(fā)生產(chǎn)的核糖核酸酶A（Ribonuclease A/RNase A）是經(jīng)過蛋白質工程技術改造的源于牛胰腺（bovine pancreas）的非特異性核糖核酸內(nèi)切酶，經(jīng)過酵母表達、純化獲得。它不含有原核生物表達的細菌內(nèi)毒素。

Part.04 產(chǎn)品信息